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1、艾滋病抗體和CD4+T淋巴細(xì)胞檢測(cè)和應(yīng)急處理操作作業(yè)指導(dǎo)書(shū)編 制： 審 核: 批 準(zhǔn)： 發(fā) 布： 二XX年X月 樣品采集和處理操作規(guī)程1目的為了做到安全、規(guī)范地進(jìn)行樣品采集和處理，保證合格的樣品質(zhì)量。2職責(zé)檢驗(yàn)人員應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行本規(guī)定，質(zhì)量監(jiān)督員對(duì)執(zhí)行情況進(jìn)行監(jiān)督。3適用范圍適用于艾滋病抗體和CD4+T淋巴細(xì)胞的檢測(cè)工作。4樣品的采集和處理操作程序：艾滋病最常用的樣品是血液，包括血清、血漿和全血。唾液或尿液有時(shí)也可作為測(cè)試樣品。常用的血液樣品的采集和處理方法如下。4.1血清樣品采集和處理：（1）用一次性注射器（或真空采血管）抽取3-5ml靜脈血，室溫下自然放置1-2h，待血液自然凝固、血塊收縮后再2、用3000r/min離心15min，吸出血清備用。（2）對(duì)所有采集的樣品及樣品送檢單進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)統(tǒng)一編號(hào)，并注明采樣日期，一周內(nèi)檢測(cè)的樣品置2-8保存，對(duì)需長(zhǎng)期保存的樣品置-20冷凍保存。4.2抗凝血樣品采集和處理：（1）用加有抗凝劑的真空采血管（或一次性注射器抽取靜脈血，轉(zhuǎn)移至加有抗凝劑的試管）抽取3-5ml靜脈血，立即握住試管兩端，顛倒混勻數(shù)次，將血液與抗凝劑充分混勻，室溫下自然放置1-2h，分離出血漿和血細(xì)胞備用。（2）對(duì)做 CD4+/CD8+T淋巴細(xì)胞測(cè)定的樣品，選用加有K3EDTA或肝素或枸椽酸鈉的抗凝管。采血后立即握住試管兩端，顛倒混勻數(shù)次，將血液與抗凝劑混勻，以防止凝固，收集樣品在23、4小時(shí)以?xún)?nèi)，送檢至省確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室或中心篩查實(shí)驗(yàn)室。（3）對(duì)所有樣品及樣品送檢單進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)統(tǒng)一對(duì)應(yīng)編號(hào)，并寫(xiě)明日期和收集時(shí)間。4.3采集樣品注意事項(xiàng)：（1）采集樣品原則上按臨床采血技術(shù)規(guī)范操作（按試劑盒說(shuō)明書(shū),有特殊要求除外）。（2）采集樣品時(shí)應(yīng)注意安全，建議采用真空采血管及蝶形針具，以避免直接接觸血液；直接接觸HIV感染者或艾滋病（AIDS）病人血液、體液的操作，應(yīng)戴雙層手套。（3）對(duì)采集樣品時(shí)產(chǎn)生的廢棄物，嚴(yán)格按照感染性醫(yī)療廢物處理要求進(jìn)行處理。4.4采樣器具的處理：（1）為防止疾病的傳播和造成不必要的事故，必須以安全為原則實(shí)行“一人一針一管一消毒”制度。（2）使用一次性注射器要選擇經(jīng)國(guó)家審批合4、格，具有“三證”的生產(chǎn)廠家生產(chǎn)的注射器。注：三證指：a、生產(chǎn)許可證國(guó)家醫(yī)藥局簽發(fā)；b、推銷(xiāo)員證省級(jí)醫(yī)藥總公司簽發(fā)；c、衛(wèi)生許可證省級(jí)衛(wèi)生行政部門(mén)簽發(fā)。（3） 使用一次性注射器前要檢查包裝是否完整。如包裝有破損和裂開(kāi)的注射器不能使用。禁止隨意打開(kāi)注射器包裝。使用前注意檢查有效期，禁止使用過(guò)期注射器。（4）一次性注射器不能重復(fù)使用，為避免交叉感染和疾病傳播，對(duì)使用過(guò)的一次性注射器進(jìn)行銷(xiāo)毀、毀形、焚燒等形式處理，并做有記錄。（5）外出現(xiàn)場(chǎng)采樣時(shí)，收集所有使用過(guò)的廢棄物（一次性注射器、一次性手套、消毒棉簽等），進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)焚燒處理，并做好記錄。附表： 采樣器具現(xiàn)場(chǎng)焚燒登記表采樣時(shí)間焚燒時(shí)間焚燒地點(diǎn)執(zhí)行人監(jiān)5、督人樣品保存和運(yùn)送操作規(guī)程1目的為了做到安全、規(guī)范地進(jìn)行樣品的保存和運(yùn)送，保證合格的樣品質(zhì)量。2職責(zé)檢驗(yàn)人員應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行本規(guī)定，質(zhì)量監(jiān)督員對(duì)執(zhí)行情況進(jìn)行監(jiān)督。3適用范圍適用于艾滋病抗體和CD4+T淋巴細(xì)胞檢測(cè)工作。4樣品的保存操作程序（1）用于抗體檢測(cè)的血清或血漿樣品，存放于-20以下，短期（1周）內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)的樣品可存放于2-8。（2）用于抗原和核酸檢測(cè)的血漿和血細(xì)胞樣品凍存于-20以下，進(jìn)行病毒RNA檢測(cè)的樣品如需保存3個(gè)月以上置于-80。（3）用于CD4+/CD8+T淋巴細(xì)胞測(cè)定的樣品不能長(zhǎng)期保存，樣品采集時(shí)間超過(guò)48小時(shí)后不予檢測(cè)。5樣品的運(yùn)送操作程序5.1實(shí)驗(yàn)室間傳遞的樣品通常是血清或血6、漿，除特殊情況外一般不運(yùn)送全血。5.2樣品運(yùn)送過(guò)程一般采用WHO提出的三級(jí)包裝系統(tǒng)。（1）第一層容器：裝樣品，要求防滲漏。樣品置于帶蓋的試管內(nèi)，試管上有明顯的標(biāo)記，標(biāo)明樣品的編號(hào)或受檢者姓名、種類(lèi)和采集時(shí)間。隨樣品附送檢單，送檢單與樣品分開(kāi)放置。（2） 第二層容器：要求耐受性好、防滲漏、容納并保護(hù)第一層容器，可以裝若干個(gè)第一層容器。將試管裝入專(zhuān)用帶蓋的容器內(nèi)，容器的材料要易于消毒處理。（3） 第三層容器：放在一個(gè)運(yùn)輸用外層包裝內(nèi)，并易于消毒。在第三層容器外面要貼標(biāo)簽（數(shù)量，收、發(fā)件人）。5.3血清和血漿樣品在2-8條件下由專(zhuān)人運(yùn)送。用于CD4+/CD8+T淋巴細(xì)胞測(cè)定的樣品在室溫下18-23運(yùn)7、送。每一包裝的體積以不超過(guò)50ml為宜。5.4運(yùn)送感染性材料必須有記錄。5.5特殊情況下如需對(duì)個(gè)別樣品進(jìn)行復(fù)測(cè)，可以用特快專(zhuān)遞形式投寄，但必須按三級(jí)包裝系統(tǒng)將盛樣品的試管包扎好，避免使用玻璃容器，以保證不會(huì)破碎和溢漏。HIV抗體篩查標(biāo)準(zhǔn)操作程序1目的為了規(guī)范HIV抗體篩查標(biāo)準(zhǔn)操作程序，特制定本規(guī)定。2職責(zé)檢驗(yàn)人員應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行本規(guī)定，質(zhì)量監(jiān)督員對(duì)執(zhí)行情況進(jìn)行監(jiān)督。3適用范圍適用于本單位HIV抗體初篩檢測(cè)點(diǎn)膠體金法實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)工作程序。4 HIV抗體篩查操作程序：HIV抗體篩查檢測(cè)流程樣 品篩查試劑初篩檢測(cè)陽(yáng)性反應(yīng)陰性反應(yīng)原有試劑+另外一種篩查試劑報(bào)告陰性重復(fù)檢測(cè)均陰性反應(yīng)一陰一陽(yáng)均陽(yáng)性反應(yīng)送篩查中心8、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)報(bào)告陰性5原理、檢驗(yàn)方法及程序要求5.1原理本法采用膠體金免疫層析技術(shù)，在玻璃纖維膜上預(yù)包被金標(biāo)記HIVgp160和gp36抗原，在硝酸纖維膜檢測(cè)線和質(zhì)控線上分別包被HIVgp41、gp36混合和抗HIVgp41抗體，當(dāng)檢測(cè)進(jìn)行時(shí)，樣品中HIV抗體可與金標(biāo)記HIV抗原結(jié)合形成復(fù)合物，由于層析作用復(fù)合紙向前移動(dòng)。若樣品中含有可被檢測(cè)的HIV抗體，則與檢測(cè)線預(yù)包被的HIV抗原結(jié)合形成“金標(biāo)記HIV抗原HIV抗體HIV包被抗原”復(fù)合物而凝聚顯色；若樣品中沒(méi)有HIV抗體或HIV抗體的含量低于檢測(cè)限時(shí)，則不形成復(fù)合物而不顯色；5.2操作步驟（北京金豪）（1）將密封袋打開(kāi)，取出所需檢測(cè)卡。（2）9、樣本檢測(cè)：在檢測(cè)卡的加樣孔中加50l待檢樣品，再加二滴緩沖液。（3） 15-20min內(nèi)觀察并記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。5.3結(jié)果判斷陽(yáng)性結(jié)果：在試紙板的檢測(cè)線和質(zhì)控線位置上各出現(xiàn)一條紅線。陰性結(jié)果：在試紙板的質(zhì)控線位置上出現(xiàn)一條紅線。無(wú)效結(jié)果：在試紙板的檢測(cè)線的質(zhì)控線位置上均未出現(xiàn)紅線。5.4注意事項(xiàng)（1）被檢測(cè)樣品應(yīng)為新鮮樣品。如發(fā)現(xiàn)試紙板破損需廢棄。（2）溶血樣品對(duì)檢測(cè)結(jié)果有影響，高血脂和高膽紅素樣品對(duì)檢測(cè)結(jié)果無(wú)顯著影響。（3）當(dāng)檢測(cè)線和質(zhì)控線上均不出現(xiàn)紅線時(shí)，應(yīng)重新測(cè)試，如果問(wèn)題仍然存在，應(yīng)立即停止使用此批號(hào)產(chǎn)品。（4）當(dāng)樣品中抗體含量極高時(shí)，質(zhì)控線條帶有所減弱，此結(jié)果仍視為有效結(jié)果。（5） 3010、分鐘后觀察結(jié)果無(wú)效。HIV抗體初篩原始記錄檢測(cè)日期 年 月 日檢測(cè)目的HIV抗體監(jiān)測(cè)檢測(cè)項(xiàng)目 HIV1+2抗體 室溫（）實(shí)驗(yàn)溫度樣品種類(lèi)樣品數(shù)送檢單位試劑種類(lèi)膠體金批 號(hào)生產(chǎn)廠家有 效 期一 檢測(cè)依據(jù)：全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范二 實(shí)驗(yàn)方法：PA 金標(biāo)（雙抗原夾心法） 硒標(biāo)三實(shí)驗(yàn)方法：(按說(shuō)明書(shū)操作)（一）操作步驟1 將密封袋打開(kāi)，取出所需檢測(cè)卡。2 樣本檢測(cè)：在檢測(cè)卡的加樣孔中加50l待檢樣品，再加二滴緩沖液。3 15-20min內(nèi)觀察并記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。（二）結(jié)果判斷陽(yáng)性結(jié)果：在試紙板的檢測(cè)線和質(zhì)控線位置上各出現(xiàn)一條紅線。陰性結(jié)果：在試紙板的質(zhì)控線位置上出現(xiàn)一條紅線。無(wú)效結(jié)果：在試紙板的檢測(cè)線的質(zhì)11、控線位置上均未出現(xiàn)紅線。12345678910ABCDEFGH移液器操作規(guī)程1目的：為了做到安全、正確地操作，維持移液器正常工作，保證移液器的準(zhǔn)確使用。2授權(quán)操作人與職責(zé)：本儀器授權(quán)經(jīng)過(guò)考核合格持證人員進(jìn)行操作,儀器操作人員須嚴(yán)格按照此規(guī)程執(zhí)行。3適用范圍：適用于艾滋病抗體檢測(cè)工作。4操作規(guī)程：（1）根據(jù)所需移液量，選擇相應(yīng)規(guī)格的移液器。（2）將移液器調(diào)節(jié)至所需的移液量。5移液器的校對(duì)5.1核校方法蒸餾水稱(chēng)量法。5.2核校步驟（1） 在室溫22無(wú)風(fēng)實(shí)驗(yàn)室中，在萬(wàn)分之一級(jí)別天平上放置一個(gè)小燒杯。（2） 用待校準(zhǔn)的移液器吸取存放過(guò)夜的蒸餾水加入燒杯底部，稱(chēng)量并計(jì)算蒸餾水重量，連續(xù)稱(chēng)重10次。（3）12、加蒸餾水的量根據(jù)待校準(zhǔn)移液器的規(guī)格而不同，10次校準(zhǔn)稱(chēng)量均在要求的重量范圍內(nèi)為合格，貼上合格標(biāo)簽，注明校準(zhǔn)日期，填寫(xiě)和保存校準(zhǔn)記錄。稱(chēng)重法校準(zhǔn)移液器方案移液器規(guī)格標(biāo)定使用蒸餾水量要求重量范圍0.5 - 10 ml2 ml1.75 - 2.25 mg5 - 40 ml10 ml9.8 - 10.2 mg40 - 200 ml70 ml69.4 - 70.6 mg200 - 1000 ml300 ml298.0 - 302.0 mg1 - 5 ml2000 ml1990.0 - 2010.0 mg2 - 10 ml3500 ml3485.0 - 3515.0 mg5.3稱(chēng)重校準(zhǔn)記錄見(jiàn)附表附表不同溫13、度時(shí)水的密度t（）0510111213141516171819d(gcm-3)0.999870.999990.999730.999630.999520.999400.999270.999130.998970.998800.998620.99843t（）2021222324252627282930d(gcm-3)0.998230.998020.997800.997560.997320.997070.996810.996540.996260.995970.99567微量移液器標(biāo)定記錄移液器規(guī)格使用蒸餾水量第1次稱(chēng)量（mg）第2次稱(chēng)量（mg）第3次稱(chēng)量（mg）第4次稱(chēng)量（mg）第5次稱(chēng)量（mg）第614、次稱(chēng)量（mg）第7次稱(chēng)量（mg）第8次稱(chēng)量（mg）第9次稱(chēng)量（mg）第10次稱(chēng)量（mg）標(biāo)定日期標(biāo)定人BRAND 550ul10ul10.010.010.010.010.210.19.910.110.010.02008.8.5劉莉BRAND20200ul70ul70.369.970.069.569.869.770.169.870.169.82008.8.5劉莉注：稱(chēng)量蒸餾水水溫為20手提式蒸汽消毒器操作規(guī)程1. 目的為保證本單位手提式蒸汽消毒器的正常運(yùn)轉(zhuǎn)，確保其出具的數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠，特制定本規(guī)程。2. 適用范圍本中心手提式蒸汽消毒器的使用和維護(hù)。3 授權(quán)操作人與職責(zé)授權(quán)操作人為經(jīng)培訓(xùn)合格，持證上15、崗的檢驗(yàn)人員，操作人必須嚴(yán)格按照此規(guī)程執(zhí)行。4 儀器使用4.1 工作原理高壓蒸汽滅菌是利用高溫和高壓的濕熱蒸汽形成很強(qiáng)的穿透力，有效殺菌。其主要優(yōu)點(diǎn)是：溫度較高，滅菌所需時(shí)間較短；蒸氣穿透力強(qiáng)；蒸氣冷凝時(shí)釋放汽化熱，能迅速提高物品的溫度；物品不過(guò)分潮濕。4.2 技術(shù)參數(shù)額定工作壓力：0.14 MPa；額定工作溫度：126；溫度選擇范圍：105-126；計(jì)時(shí)選擇范圍：0-60min；最大安全壓力：0.165Mpa；滅菌室熱均勻度：1；電源電壓 / 功率：AC220V.50Hz / 2KW；容積：18L。4.3 操作步驟4.3.1、儀器安裝條件要求電源為220V單相交流電；環(huán)境溫度50C-400C16、，相對(duì)濕度80%；儀器接地可靠。4.3.2、裝、放置滅菌物品（1）、把待滅菌物品放入滅菌器內(nèi)膽中，應(yīng)盡量把同類(lèi)物品放在一起滅菌。（2）、物品包的體積不得超過(guò)30cm30cm25cm.（3）、物品裝放時(shí)，上下左右都要留有一定的間隔以利于蒸汽置換空氣。（4）、下排氣式壓力蒸汽滅菌器裝載量不得超過(guò)柜室內(nèi)容量的80%。（5）、每次滅菌都要放置滅菌效果指示物，放置位置按消毒技術(shù)（衛(wèi)生部2002）要求執(zhí)行。（6）、蓋上消毒器蓋，注意排氣管要插入內(nèi)膽側(cè)面孔道中，檢查密封墊圈是否平整或有無(wú)損壞，然后擰緊蓋上的螺絲。4.3.3、消毒4.3.3.1、參數(shù)設(shè)定（1）、設(shè)定消毒溫度：把旋鈕擰至預(yù)定溫度處。（2）、設(shè)定17、消毒時(shí)間：把旋鈕擰至預(yù)定時(shí)間處。4.3.3.2、消毒啟動(dòng)按啟動(dòng)鍵滅菌器進(jìn)入升溫過(guò)程，當(dāng)內(nèi)室溫度達(dá)到滅菌溫度時(shí)，開(kāi)始滅菌倒記時(shí)。、消毒結(jié)束當(dāng)消毒時(shí)間為遞減為0，壓力表為0時(shí)，打開(kāi)消毒器蓋，取出消毒物品，消毒結(jié)束。4.4注意事項(xiàng)4.4.1必須嚴(yán)格按照消毒或滅菌程序滅菌，否則消毒或滅菌效果得不到保證。4.4.2使用前應(yīng)檢查水箱內(nèi)水位，每周換一次水。4.5儀器維護(hù)與保養(yǎng)消毒器的外表及滅菌室內(nèi)要保持清潔。 經(jīng)常檢查下排氣管是否暢通。消毒器蓋上的膠圈無(wú)損壞。最好每天使用完后在膠條上涂滑石粉。以延長(zhǎng)膠條壽命。4.6期間核查：壓力表每半年送檢定一次，每半年對(duì)滅菌器的壓力表、安全閥門(mén)等的運(yùn)行情況及滅菌效果進(jìn)行檢18、查，發(fā)現(xiàn)異常，立即停止使用，待專(zhuān)業(yè)人員修完好以后才能使用。電動(dòng)離心機(jī)操作規(guī)程1目的為了做到安全、文明操作，維持電動(dòng)離心機(jī)正常工作，維護(hù)好儀器的正常運(yùn)行。2授權(quán)操作人與職責(zé)授權(quán)操作人為經(jīng)培訓(xùn)合格，持證上崗的檢驗(yàn)人員，操作人員必須嚴(yán)格按照此規(guī)程執(zhí)行。3適用范圍適用于艾滋病抗體檢測(cè)工作。4操作程序4.1方法：首先將本機(jī)放在比較平整而堅(jiān)實(shí)的臺(tái)面上，關(guān)閉各種工作開(kāi)關(guān)，將調(diào)速旋鈕調(diào)到最低位置，把定時(shí)器旋鈕調(diào)到你所需要的時(shí)間，再打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)，由低速成逐漸向高速調(diào)至你需要的工作速度。4.2注意事項(xiàng)：（1） 使用時(shí)一定要接地線。（2） 使用時(shí)須將有機(jī)玻璃蓋頭蓋好，以減少噪聲及空氣的阻力。（3） 離心管內(nèi)所加的物19、質(zhì)應(yīng)相對(duì)平衡，偏差小于3克。每分鐘轉(zhuǎn)速 相對(duì)離心力1000 88倍2000 355倍3000 799倍4000 1420倍在靜止時(shí)離心力為零。檢測(cè)數(shù)據(jù)的記錄與保存操作規(guī)程1目的為了檢測(cè)數(shù)據(jù)規(guī)范化管理，確保原始資料的妥善保存，維持原始資料的真實(shí)性、完整性。2職責(zé)檢驗(yàn)人員應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行本規(guī)定，質(zhì)量監(jiān)督員對(duì)執(zhí)行情況進(jìn)行監(jiān)督。3適用范圍適用于艾滋病抗體檢測(cè)工作。4操作程序4.1、實(shí)驗(yàn)原始記錄：根據(jù)HIV抗體檢測(cè)實(shí)驗(yàn)要求，按照不同生產(chǎn)廠家試劑盒的說(shuō)明書(shū)，我們?cè)O(shè)計(jì)了操作可行的實(shí)驗(yàn)原始記錄表，表頭注明有檢測(cè)日期、報(bào)告日期、檢測(cè)目的、樣品份數(shù)、樣品種類(lèi)、檢測(cè)項(xiàng)目、試劑種類(lèi)、試劑批號(hào)、試劑效期、生產(chǎn)廠家、室內(nèi)溫度、20、濕度、送檢單位；表中設(shè)有使用標(biāo)準(zhǔn)、實(shí)驗(yàn)方法、設(shè)備要求等；下表格內(nèi)設(shè)有空白對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照以及待檢樣品的位置；并附有檢測(cè)者及審核者簽名。后附表格：4.2、結(jié)果打印記錄：每次檢測(cè)結(jié)果均經(jīng)過(guò)認(rèn)真審核作出判斷后，再由打印機(jī)打印，打印結(jié)果與實(shí)驗(yàn)原始記錄一一對(duì)應(yīng)。4.3、數(shù)據(jù)保存：每次報(bào)告發(fā)放后，將所有檢測(cè)數(shù)據(jù)的記錄進(jìn)行整理歸檔，由專(zhuān)人、專(zhuān)柜保存。保密規(guī)定1目的為了維護(hù)服務(wù)對(duì)象合法權(quán)益，確保個(gè)人隱私不受侵害。2職責(zé)檢驗(yàn)人員應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行本規(guī)定，質(zhì)量監(jiān)督員對(duì)執(zhí)行情況進(jìn)行監(jiān)督。3適用范圍適用于艾滋病抗體檢測(cè)工作。4操作程序4.1、保密內(nèi)容：艾滋病抗體檢測(cè)點(diǎn)所有工作人員具有高度的保密意識(shí)，不可對(duì)無(wú)關(guān)人員透露21、檢測(cè)結(jié)果，與HIV/AIDS相關(guān)檢測(cè)項(xiàng)目的所有資料進(jìn)行嚴(yán)格保密，包括送檢單、檢測(cè)記錄的保管、報(bào)告單的發(fā)放和工作人員年度采血檢測(cè)等進(jìn)行保密。4.2、保密制度：（1） 對(duì)前來(lái)接受血液檢查或咨詢(xún)者所有資料絕對(duì)保密。保密等級(jí)：機(jī)密級(jí)。（2） 有專(zhuān)人、專(zhuān)柜負(fù)責(zé)保管各種實(shí)驗(yàn)記錄、檔案資料；感染者檔案不得擅自擅修訂和銷(xiāo)毀；嚴(yán)格遵守保密制度，未經(jīng)省級(jí)衛(wèi)生行政部門(mén)許可，不得向無(wú)關(guān)人員或單位提供任何情況。（3） HIV抗體初篩檢測(cè)的陽(yáng)性結(jié)果不是最終結(jié)果，應(yīng)及時(shí)作進(jìn)一步的確認(rèn)，初篩實(shí)驗(yàn)室不能出具HIV抗體陽(yáng)性的結(jié)果報(bào)告，更不能告知受檢者本人。（4） HIV抗體確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)的陽(yáng)性結(jié)果，以機(jī)密級(jí)向送檢單位出具陽(yáng)性報(bào)告22、。（5） 所有經(jīng)確認(rèn)的陽(yáng)性標(biāo)本，包括在實(shí)驗(yàn)室留存的標(biāo)本，應(yīng)送省級(jí)HIV抗體確認(rèn)中心，或者省級(jí)衛(wèi)生行政部門(mén)指定的單位保存，不得擅自處理。實(shí)驗(yàn)室的清理、消毒規(guī)程1目的為了維護(hù)實(shí)驗(yàn)室的生物安全，確保人體健康，預(yù)防環(huán)境污染。2職責(zé)檢驗(yàn)人員應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行本規(guī)定，質(zhì)量監(jiān)督員對(duì)執(zhí)行情況進(jìn)行監(jiān)督。3適用范圍適用于艾滋病抗體檢測(cè)工作。4操作程序4.1實(shí)驗(yàn)室清理（1） 實(shí)驗(yàn)室工作人員要熟悉生物材料安全操作知識(shí)和消毒技術(shù)。（2） 工作時(shí)，要戴手套、穿工作服和隔離衣，不用戴手套的手觸摸暴露的皮膚、口唇、眼睛、耳朵和頭發(fā)等，盡量避免使用尖銳物品和器具。（3） 檢驗(yàn)人員應(yīng)注意自身的防護(hù)，在未證實(shí)之前，所有的標(biāo)本均應(yīng)當(dāng)作“陽(yáng)性23、”標(biāo)本看待。（4） 實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中如試劑、標(biāo)本外濺時(shí)立即用配制好的1：200的84消毒液進(jìn)行噴灑清理。（5） 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作臺(tái)面廢棄物進(jìn)行清理后，再用75%酒精進(jìn)行噴灑消毒。對(duì)實(shí)驗(yàn)室地面用1：200的84消毒液進(jìn)行處理。4.2實(shí)驗(yàn)室廢棄物的消毒（1） 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，把所有清理的廢棄物視為感染性廢棄物，置于專(zhuān)用的防漏溶器中，安全運(yùn)至清洗消毒室進(jìn)行高壓蒸汽消毒（121消毒30分鐘）。（2） 每次高壓消毒進(jìn)行登記、記錄。后附登記表。（3） 所有廢棄物的處理均符合實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求（GB19489-2004）和消毒技術(shù)規(guī)范（2002年版）。實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)操作規(guī)程1目的為了維護(hù)實(shí)驗(yàn)室的生物安24、全，確保檢測(cè)人員健康，預(yù)防環(huán)境污染。2職責(zé)檢驗(yàn)人員應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行本規(guī)定，質(zhì)量監(jiān)督員對(duì)執(zhí)行情況進(jìn)行監(jiān)督。3適用范圍適用于艾滋病抗體檢測(cè)工作。4操作程序4.1個(gè)人防護(hù)及保健：艾滋病實(shí)驗(yàn)室所用的個(gè)人防護(hù)裝備應(yīng)符合國(guó)家有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的要求。（1） 防護(hù)服：實(shí)驗(yàn)室配備足夠的防護(hù)服，不時(shí)將清潔的防護(hù)服置于實(shí)驗(yàn)室清潔區(qū)內(nèi)專(zhuān)用存放處。（2） 離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室時(shí)，脫去防護(hù)服，每次穿過(guò)的污染的防護(hù)服及時(shí)消毒。（3） 有HIV液體有可能濺到工作人員時(shí)，應(yīng)使用防滲透性的塑料。（4） 實(shí)驗(yàn)室配備實(shí)驗(yàn)專(zhuān)用的工作鞋、一次性手套、一次性口罩、安全防護(hù)眼鏡及沖洗眼睛的裝置。（5） 進(jìn)實(shí)驗(yàn)室前要摘除首飾，修剪長(zhǎng)的帶刺的指甲，以免刺破手套。（6）25、 當(dāng)發(fā)現(xiàn)防護(hù)服已被污染時(shí)，應(yīng)立即更換。（7） 進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室應(yīng)穿隔離衣戴手套，接觸傳染危險(xiǎn)性大的樣品，要戴雙層手套和防護(hù)眼鏡。（8） 離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室前必須脫去隔離衣、洗手；嚴(yán)禁在艾滋病實(shí)驗(yàn)室進(jìn)食、飲水、吸煙和化妝。（9） 實(shí)驗(yàn)室工作人員從事工作前必須進(jìn)行艾滋病抗體和乙肝、丙肝等肝炎病毒標(biāo)記物的檢測(cè)；注射乙肝疫苗；每半年至一年進(jìn)行一次艾滋病抗體檢測(cè)，并保留血清樣品。4.2建立管理制度：（1） 實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備、建筑和設(shè)施的安全性必須符合實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求GB19489-2004和全國(guó)艾滋病抗體檢測(cè)技術(shù)規(guī)范要求。（2） 每年對(duì)安全工作制度或安全標(biāo)準(zhǔn)操作程序及其實(shí)施情況進(jìn)行檢查和修訂，并有記錄。（3） 制26、定意外事故處理預(yù)案，建立意外事故的登記和報(bào)告制度。（4） 實(shí)驗(yàn)室主任負(fù)責(zé)組織對(duì)突發(fā)事件和職業(yè)暴露事故進(jìn)行調(diào)查、登記、處理和報(bào)告（5） 建立崗前培訓(xùn)教育制度。實(shí)驗(yàn)室的安全責(zé)任人要對(duì)工作和環(huán)境的安全負(fù)責(zé)，所有工作人員都有責(zé)任保護(hù)自己和他人的安全。告知新上崗人員實(shí)驗(yàn)室工作的潛在危險(xiǎn)，進(jìn)行安全教育，直至有能力后方可單獨(dú)工作。（6） 對(duì)新調(diào)入人員、外來(lái)合作、進(jìn)修和學(xué)習(xí)的人員在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室之前必須經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)室主任的批準(zhǔn)。非實(shí)驗(yàn)室人員和非實(shí)驗(yàn)室物品不得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。4.3、安全操作（1） 進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室必須穿隔離衣、戴手套，必要時(shí)戴防護(hù)眼睛，以防污染暴露的皮膚和衣物，不用戴手套的手觸摸暴露的皮膚、口唇、眼睛、耳朵和頭27、發(fā)等。（2） 接觸傳染性危險(xiǎn)性大的樣品時(shí)戴雙層手套以增加保護(hù)，操作時(shí)手套破損立即丟棄、洗手后并戴上新手套。（3） 禁止用口腔吸液管，必須使用移液器操作所有液體。（4） 檢查樣品的狀況，記錄有無(wú)嚴(yán)重溶血、微生物污染、血脂過(guò)多以及黃疸等情況。如果污染過(guò)重或者認(rèn)為樣品不能被接受，則應(yīng)將樣品安全廢棄。要將情況立即通知送樣人。（5） 操作中有標(biāo)本、檢測(cè)試劑外濺時(shí)及時(shí)消毒，對(duì)大量濺出的濃度高的傳染物在清潔之前先用1%次氯酸鈉溶液浸泡，然后戴上手套擦凈。（6） 工作完畢，對(duì)工作臺(tái)面用0.1%-0.2%次氯酸鈉溶液進(jìn)行消毒；用消毒液清洗后要干燥20min以上。（7） 工作完畢脫去手套后洗手，再脫去工作服，用肥28、皂和流水洗手。（8） 對(duì)HIV抗體陽(yáng)性樣品做好標(biāo)記單獨(dú)保存。實(shí)驗(yàn)中的質(zhì)量控制操作規(guī)程1目的為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，維持檢測(cè)報(bào)告的客觀公正。2職責(zé)檢驗(yàn)人員應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行本規(guī)定，質(zhì)量監(jiān)督員對(duì)執(zhí)行情況進(jìn)行監(jiān)督。3適用范圍適用于艾滋病抗體檢測(cè)工作。4操作程序4.1質(zhì)量控制的概念質(zhì)量控制是指為確保實(shí)驗(yàn)工作正常進(jìn)行而在每一次實(shí)驗(yàn)過(guò)程中必須采取的各種措施。質(zhì)量控制也是實(shí)施實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量保證的一部分，它表明每一步操作產(chǎn)生可信的結(jié)果。質(zhì)量控制具體內(nèi)容是指將控制品（內(nèi)部對(duì)照或外部對(duì)照）和檢測(cè)標(biāo)本一起實(shí)驗(yàn)操作，從控制值了解分析過(guò)程的質(zhì)量情況。為便于觀測(cè)和概括，又使用了一些統(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行歸納和分析。質(zhì)量控制的最終結(jié)果可以了29、解本次實(shí)驗(yàn)是否有效，所有試驗(yàn)條件是否正常，以及所有試驗(yàn)結(jié)果是否可靠。檢測(cè)HIV抗體后能提供準(zhǔn)確的檢驗(yàn)報(bào)告，是每一個(gè)從事HIV抗體檢驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室的最高宗旨。而為了達(dá)到這一目的，建立一個(gè)良好的質(zhì)量控制程序是十分重要的。必須強(qiáng)調(diào)的是，實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)量控制是室間質(zhì)量評(píng)價(jià)（外部質(zhì)量評(píng)價(jià)）的基礎(chǔ)。4.2質(zhì)量控制的基本要求：（1） 必須使用經(jīng)衛(wèi)生部批準(zhǔn)或注冊(cè)，經(jīng)過(guò)中國(guó)藥品生物制品檢定所批批檢定合格的國(guó)產(chǎn)或進(jìn)口HIV抗體初篩和確認(rèn)檢測(cè)試劑。初篩用的HIV檢測(cè)試劑必須是HIV12混合型。在選用試劑時(shí)應(yīng)優(yōu)先選擇經(jīng)過(guò)臨床評(píng)估質(zhì)量?jī)?yōu)良的試劑盒。（2） 必須使用在有效期內(nèi)且保存條件符合要求的診斷試劑。（3） 必須按照SOP30、中規(guī)定的要求進(jìn)行操作，包括進(jìn)行檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)條件如陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照的設(shè)置、試劑、標(biāo)本加樣量、孵育時(shí)間、反應(yīng)溫度、洗滌程序和次數(shù)等。（4） 在實(shí)驗(yàn)前必須檢查所有待檢標(biāo)本的質(zhì)量，如有脂血、溶血或污染的標(biāo)本原則上不能使用，必須重新采集標(biāo)本。若無(wú)法重新采集標(biāo)本，必須在室主管批準(zhǔn)下使用，在檢測(cè)結(jié)果中應(yīng)該注明該份標(biāo)本的情況。（5） 冰凍的標(biāo)本待全部融化后必須充分搖勻。艾滋病職業(yè)暴露應(yīng)急處理操作規(guī)程1目的為有效地預(yù)防控制艾滋病職業(yè)暴露的發(fā)生，切實(shí)保護(hù)艾滋病防治工作人員的身心健康。2職責(zé)檢驗(yàn)人員應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行本規(guī)定，質(zhì)量監(jiān)督員對(duì)執(zhí)行情況進(jìn)行監(jiān)督。3適用范圍適用于實(shí)驗(yàn)室、醫(yī)護(hù)、預(yù)防保健人員及司法、公安、收容等有關(guān)的監(jiān)31、管工作人員，在從事艾滋病防治及相關(guān)工作的過(guò)程中意外被艾滋病病毒感染者或艾滋病患者的血液、體液感染了破損的皮膚或非胃腸道粘膜，或者含有艾滋病病毒的血液、體液感染的針頭及其它銳器刺破皮膚，而具有被艾滋病病毒感染的可能性。4操作程序4.1暴露后預(yù)防性用藥（1） 基本用藥程序：兩種逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，使用常規(guī)治療計(jì)量，連續(xù)服用28天，如雙汰芝（AZT與3TC聯(lián)合制劑）300mg/次，每日2次，連續(xù)服用28天。本程序適用輕度低危暴露。 （2） 強(qiáng)化用藥程序：基本用藥程序加一種蛋白酶抑制劑，如佳息患，劑量為800mg，每日3次，連續(xù)服用28天。本程序適用于嚴(yán)重暴露。4.2艾滋病病毒暴露后預(yù)防的處理緊急局部處理32、（1） 用肥皂和水清潔污染的皮膚，用生理鹽水沖洗粘膜。（2） 如有傷口，應(yīng)輕輕擠壓，盡可能擠出損傷處的血液，用肥皂水或清水沖洗。（3） 受傷部位的消毒：傷口應(yīng)用消毒液（如70酒精，0.20.5過(guò)氧乙酸，0.5碘伏等）浸泡或涂抹消毒，并包扎傷口。被暴露的粘膜，應(yīng)用生理鹽水或清水沖洗干凈。4.3 安全事故的報(bào)告、檢測(cè)或保密（1） 重大事故事故發(fā)生單位及時(shí)向有關(guān)艾滋病病毒職業(yè)暴露安全藥品儲(chǔ)備點(diǎn)報(bào)告，儲(chǔ)備點(diǎn)負(fù)責(zé)人聯(lián)系當(dāng)?shù)赜嘘P(guān)專(zhuān)家根據(jù)情況共同進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)的評(píng)估，確定用藥的必要性、預(yù)防藥物和用藥程序，并將處理情況向主管行政部門(mén)報(bào)告。由省級(jí)艾滋病病毒檢測(cè)中心抽血檢測(cè)被暴露著的抗艾滋病病毒抗體，該血清留樣備用。如33、果暴露以前已有艾滋病病毒抗體的化驗(yàn)結(jié)果，則應(yīng)加以記錄。暴露后一年內(nèi)要定期檢測(cè)抗體，即分別在暴露后6周、12周、6個(gè)月、12個(gè)月檢測(cè)。（2） 小型事故小型事故可在緊急處理后立即將事故情況和處理措施報(bào)告上管領(lǐng)導(dǎo)和有關(guān)專(zhuān)家，以及時(shí)發(fā)現(xiàn)處理中的疏漏之處，使處理盡量完善妥當(dāng)。不進(jìn)行暴露后預(yù)防用藥者，也要定期檢測(cè)HIV抗體，檢測(cè)時(shí)間同前。（3）無(wú)論重大事故或小型事故，對(duì)事故涉及的職業(yè)暴露者在整個(gè)處理過(guò)程中，均應(yīng)注意做好保密工作。每一得到信息的機(jī)構(gòu)或個(gè)人均應(yīng)嚴(yán)守秘密。4.4評(píng)估對(duì)于污染源要檢測(cè)艾滋病病毒。暴露于艾滋病病毒的潛在污染源包括：血、血性體液、精液、陰道分泌物、腦脊液、胸水、腹水、心包液、滑膜液、羊34、水和組織或病毒培養(yǎng)液。鑒于醫(yī)務(wù)人員暴露后的感染率很低而用藥的毒、副作用很大，所以應(yīng)嚴(yán)格掌握用藥的指征。5建立安全事故登記和報(bào)告制度（1）當(dāng)?shù)丶部刂行臑槭鹿侍幚韱挝唬瑧?yīng)建立“艾滋病職業(yè)暴露人員個(gè)案登記表”對(duì)事故情況進(jìn)行登記和保存。詳細(xì)記錄事故發(fā)生的時(shí)間、地點(diǎn)及經(jīng)過(guò)；暴露方式；損傷的具體部位、程度；接觸物種類(lèi)（培養(yǎng)液、血液或其他體液）和含有艾滋病病毒的情況；處理方法及處理經(jīng)過(guò)；是否采用暴露后預(yù)防藥物，并詳細(xì)記錄用藥情況、首次用藥時(shí)間（暴露后幾小時(shí)或幾天）、藥物毒副作用情況（包括肝腎功能化驗(yàn)結(jié)果）、用藥的依從性狀況。（2）定期檢測(cè)艾滋病病毒抗體及進(jìn)行隨訪。結(jié)果填寫(xiě)在“艾滋病職業(yè)暴露人員個(gè)案登記表”內(nèi)35、。（3）報(bào)告制度自2003年開(kāi)始，每年6月25日前和12月25日前，各事故處理單位將上半年與下半年填寫(xiě)的“艾滋病職業(yè)暴露人員個(gè)案登記表”報(bào)至十堰市疾病預(yù)防控制中心。6儲(chǔ)備庫(kù)（點(diǎn)）的設(shè)置、組織管理和發(fā)展6.1設(shè)置（1） 全省儲(chǔ)備點(diǎn)設(shè)在武漢大學(xué)中南醫(yī)院。聯(lián)系人為武漢大學(xué)中南醫(yī)院桂希恩教授，電話02767813076。（2） 儲(chǔ)備點(diǎn)藥物供應(yīng)對(duì)象為全市各級(jí)醫(yī)療衛(wèi)生、公安、司法、科研等單位發(fā)生職業(yè)暴露的人員。（3） 抗艾滋病病毒藥物的儲(chǔ)備；儲(chǔ)備點(diǎn)常規(guī)儲(chǔ)備3種藥物，包括逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑雙汰芝和蛋白酶抑制佳息患。儲(chǔ)備藥品量可應(yīng)急處理25次事故。（4） 需使用本省儲(chǔ)備點(diǎn)抗艾滋病藥物的，發(fā)生HIV職業(yè)暴露的單位直接與儲(chǔ)備點(diǎn)聯(lián)系人聯(lián)系，經(jīng)專(zhuān)家研究后，確需用藥的，由中南醫(yī)院按程序發(fā)藥，并報(bào)省衛(wèi)生廳疾控處和省疾控中心備案。藥品儲(chǔ)備點(diǎn)必須24小時(shí)安排值班，并可隨時(shí)根據(jù)省衛(wèi)生廳疾控處通知發(fā)藥。（5） 藥品費(fèi)用由使用單位支付，緊急情況可先取藥后交費(fèi)。單位經(jīng)濟(jì)困難者，提出申請(qǐng)，經(jīng)市衛(wèi)生局同意后，報(bào)省衛(wèi)生廳審批，可免費(fèi)提供藥品。